A kalibrációs görbéket használják az ismeretlen anyagok koncentrációjának meghatározására az ismert koncentrációjú oldatok korábbi mérései alapján. A mérések pontossága és pontossága a kalibrációs görbétől függ. Minél jobb a görbe, annál pontosabb a válasz, annál rosszabb a görbe, annál rosszabb a pontosság. Ez egyfajta összehasonlítási módszer, az ismeretlenet összehasonlítják egy ismert módszerrel.A kalibrációs görbéket mindenféle méréshez használják, sokféle gépet használva. Ez a példa spektrofotométert használ.
Hígítsa a standard oldatot különböző koncentrációkra. Jellemző, hogy tízszeres, 20-szoros, 30-szoros vagy más, lépésenként oldatot készít. Minden hígítást kétszer végezzen úgy, hogy minden minta két példányban legyen.
Számítsa ki a hígított oldatok koncentrációját. A tízszeres hígítás új koncentrációjának példája az első oldat koncentrációja szorozva 0,10-del.
Olvassa le a hígított oldatok abszorbanciáját a spektrofotométeren. Helyezzen egy küvettát a spektrofotométerbe úgy, hogy a háromszög jelölése sorakozódjon a fénypályával. Csukja be a spektrofotométer fedelét és nyomja meg a nulla gombot. Növelje a gépet desztillált vízzel minden öt mintánként. Ha a gépet nullára állítják, ugyanolyan módon olvassa el a mintákat. Az egyetlen különbség az, hogy megnyomja az enter billentyűt az abszorbancia eléréséhez. A fedél bezárása után nyomja meg az enter gombot. Jegyezze fel ezeket az értékeket egy notebookba.
Ábrázolja az abszorbanciaképességet az összes minta kiszámított ismert koncentrációival szemben. Az ismert koncentráció az X tengelyen és az abszorbancia az Y tengelyen van. A legjobb, ha a grafikonot számítógépes grafikus programban hozza létre.
A grafikus program segítségével kiszámolhatja a grafikus pontok regressziós sorát. A hígításhoz a két pont egyikét törölhetjük, hogy a legjobb regressziós vonalat kapjuk. Ez az a pont, amikor minden hígítást két példányban készítenek el. Minél közelebb van az R ^ 2 érték egyhez, annál jobb a regressziós vonal. Jegyezzük fel a regressziós egyenletet.
Olvassa le az ismeretlen koncentrációjú oldat abszorbanciáját a spektrofotométeren. Jegyezzük fel ezt az abszorbenciát.
Számítsuk ki az ismeretlen oldat koncentrációját a regressziós vonal egyenlettel. Az ismeretlen abszorpciót Y-vel helyettesítjük az egyenletben. Megoldja az X egyenlet, a koncentráció értékét.