Tartalom
Az Escherichia coli, E. coli egy baktérium, amely az emlősök alsó bélében nő. Ezt a baktériumot először fedezték fel az 1800-as évek végén. Azóta régóta használják tudományos kutatásban. Ez a molekuláris genetikában a legszélesebb körben alkalmazott szervezet. Az E. coli tudományos kutatásban általánosan használt okának az egyik része az, hogy könnyen termeszthető laboratóriumban. Az E. coli növekedését megkönnyítő tényezők az egyszerű táplálkozási igények, a gyors növekedési ráta és a mérsékelt karbantartási igények.
Sterilizáljuk a beoltó hurkot úgy, hogy a Bunsen égő lángjába helyezzük. Vezesse át a hurok alsó felét a lángon, amíg vörösre nem vált.
Hagyja lehűlni a hurkot. Megérinti a tányéron lévő steril agarhoz, hogy megbizonyosodjon arról, hogy lehűlt-e. Ne tegye a hurkot az asztalra, és ne hagyja, hogy a steril agartól vagy a kívánt tenyészettől bármi mással érintkezzen, miután sterilizálták.
Merítse a hurkot az E. coli tenyészetbe, majd távolítsa el.
Nyissa fel az agarlemezt, és óvatosan csúsztassa előre és hátra a hurkot az agar egyik szakaszának felületén. Ügyeljen arra, hogy ne karcolja át az agar agarját. Az agar biztosítja a tápanyagokat, amelyekhez az E. coli-nak növekednie kell.
Tegye vissza a hurkot a Bunsen égő lángjába, hogy sterilizálja. Amint a hurokrúd lehűl, érintse meg a lemez steril részéhez, hogy megbizonyosodjon arról, hogy lehűl-e, majd csúsztassa át a hurkot az első csíkon keresztül, hogy második csík legyen. Ez a második sáv az első sáv hígított változata. Ismételje meg a sterilizálást és a siklást addig, amíg az agarlemez több szakaszát át nem csúsztatják. Ennek oka az, hogy később egyedüli, klonális kolóniákból válogathat. Ez segít abban, hogy legalább egy részlettel rendelkezzen, amelyben különálló kolóniák vannak - nem túl koncentráltak (amelyek túl sok növekedést mutatnak, és nem teszik lehetővé az egyetlen kolóniából való válogatást) és nem túl hígak (ami nem adna telepeket) .
Sterilizálja a hurkot a lángban még egyszer, mielőtt félretenné a munkaterületen.
Helyezze vissza a tetejét az agarlapra. Fordítsa meg a lemezt fejjel lefelé, és tegye az inkubátorba 37 ° C-ra (98,6 fok). Ez az ideális inkubációs hőmérséklet szimulálja az emberi test hőmérsékletét, ahol az E. coli lakik. 24-48 órán belül az E. coli baktériumok látható kolóniái megjelennek az agarlemezen.